影响外援DNA转化大肠杆菌转化率的主要因素有哪些?
创始人
2025-05-31 02:36:24
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影响外援DNA转化大肠杆菌转化率的主要因素有哪些?
适宜的温度和理化因素。 一般用氯化钙处理使细胞处于激活状态,课大大提高转化效率。
各类离子浓度,Ca,Na,Ka等等。温度也是影响因素之一 。至于生物因素,就有点复杂了……
温度,离子浓度,可以用一些化学试剂辅助,Cacl,电击,RUcl,等方法增加细胞膜的通透性
一个看大肠杆 菌的生长情况,最好用处于对数期的来制备感受态。再者,不论是用Ca离子还是电击,这时的大肠杆菌是处于一种病态的状况,很容易死掉,所以离心的转速要小点,用枪吹打时不要太剧烈。另外在混合前最好先把质粒放到42℃水浴锅里预热10分钟,这样效果应该会好点。希望对你有用。
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